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 [생물학 보고서] DNA Isolation, PCR, 전기영동 실험 |
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| 소개글 |
[생물학 보고서] DNA Isolation, PCR, 전기영동 실험 |
| 요약 |
<-Date><>
<-Title><①DNA Isolation ②PCR(polymerase chain reaction) ③전기영동(electrophoresis)>
<-Object ><①박테리아로부터 DNA를 분리해 낸다. ②특정 DNA 부위를 반복 합성하여 원하는 DNA 분자를 증폭 시킨다. ③전기영동은 DNA를 크기에 따라서 분리하는 방법이다.>
<-Materials& Methods ><①Cell lysis sol, proteinase K, RNase, PPT sol, e-tube, DNA binding sol, spin colmn, column washing sol, water, 원심분리기 1. Cell lysis sol 300㎕ (inverting) 2. proteinase K 10㎕ (inverting) 56℃에서 15분 3. RNase A 3㎕ 37℃에서 15분 4. PPT sol 100㎕→ Vortexing→ In ice에서 5분 5. 10분 동안 1300rpm centrifuge 6. 상등액 390㎕→ e-tube→ DNA binding sol 600㎕ 7. 650㎕ in Spin column→ 1분 동안centrifuge 8. Column washing sol 600㎕→ 1분 동안centrifuge 9. Column washing sol 500㎕→ 1분 동안centrifuge 10. spin column을 새 e tube에 옮기고 water 100㎕를 넣고 5분 정지 후 1분 간 centrifuge. ②DNA polymerase, Template DNA, primers, dNTPs, mixture, reaction buffer, PCR tube, 증류수, pipette tip, pipette (일반적으로 PCR 반응은 total volume 50μl 로 수행함) 1. PCR tube에 NTPs buffer 4㎕와 reaction buffer 5㎕를 넣는다. 2. Template DNA 1㎕를 넣고 forward, reverse primer를 각각 > |
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