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| 소개글 |
환경미생물실험 - 그람염색 |
| 요약 |
◈ 환경공학기초실험 보고서 ◈
<소속><학년><학번><실험조><성명><담당교수님>
<환경공학과>< >< >< >< >< >
<실습일자>< ><제출일자>< >
▣ 이론 ▣
그람염색법(Gram staining)은 1884년에 덴마크의 미생물학자인 Christian Gram에 의해 고안된 감별염색법(differential staining)으로 세균을 두 그룹으로 구분하여 준다. 그람염색법에 의하여 세균들은 그람양성(gram positive)과 그람음성(gram negative)으로 구분되며 이런 특성은 세균의 분류, 동정에 있어서 매우 중요한 특성이 된다.
그람염색법은 단염색법에서 관찰할 수 있는 세균들의 크기, 형태, 배열상태 뿐만 아니라 세균을 그람양성과 음성의 두 그룹으로 구분 할 수 있다. 실험과정에서 단염색은 한 가지 염색액만 사용하는 반면 그람염색법은 세균들을 두 종류로 구분하기 위하여 두 종류의 염색액을 사용한다.
염색과정 중 핵심적인 과정은 일차염색과 탈색, 그리고 대조염색 등이다. 그 중에서도 탈색과정이 가장 중요한 의미를 지닌다. 일차염색(primary stain)에 사용된 crystal violet이 탈색제(decolorizing agent)에 의해 탈색되는지 여부에 의해 실험 결과가 결정되며, 탈색정도는 세균 세포벽 구성성분의 차이에 의하여 결정된다. 그람양성균은 20~28 정도의 두꺼운 peptidoglycan층을 지니고 있고, 그람음성세균은 2~7 정도의 그람양성균에 비하여 얇은 peptidoglycan층을 지니고 있으며 지질(lipid)을 함유한 층을 바깥쪽에 지니고 있다. 따라서 이런 세포벽 구성 성분의 차이에 의해 세균들은 두 그룹으로 구분될 수 있다.
crystal violet을 염색 후에 사용된 Gram's iodine은 매염제(mordant)로서 crystal violet과 결합하여 불용성의 crystal violet-iodine(CVI) 복합체를 형성하여 염색능을 향상시킨다. 단백질 변성과 지질의 용매로 작용하는 95% 에탄올을 일정시간 동 |
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환경미생물실험 - 그람염색
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